- 董昊;高爽;宋倩;徐闯;孙旭东;
为了探讨乙酰乙酸(acetoacetic acid, ACAC)能否通过激活奶牛乳腺上皮细胞的未折叠蛋白反应(unfolded protein response, UPR)导致奶牛乳腺上皮细胞凋亡，试验用0,0.6,1.2,2.4 mmol/L的ACAC诱导MAC-T 24 h;或用500μg/mL牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid, TUDCA)预处理MAC-T 12 h后再加入1.2 mmol/L ACAC处理24 h。使用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测细胞凋亡率；通过实时荧光PCR方法检测凋亡相关基因[B淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl2)、Bcl2相关蛋白X(Bcl2 associated X,Bax)、半胱氨酸蛋白酶9(cysteine protease 9,Caspase9)和半胱氨酸蛋白酶3(cysteine protease 3,Caspase3)]与UPR相关基因[葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78 ku, GRP78)、激活转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)和X盒结合蛋白1s(X-box binding protein 1s, XBP1s]的相对表达量。结果表明：用0.6,1.2,2.4 mmol/L的ACAC处理MAC-T后，细胞凋亡率呈剂量依赖性升高；凋亡相关基因Bcl2表达下调，Bax、Caspase9、Caspase3表达上调；UPR的下游基因GRP78、ATF4和XBP1s表达上调。用TUDCA预处理后，缓解了ACAC导致的MAC-T凋亡相关基因和UPR下游基因表达的变化及细胞凋亡率升高。说明高浓度的ACAC通过UPR导致奶牛乳腺上皮细胞凋亡。
2023年19期 No.679 1-7+12页 [查看摘要][在线阅读][下载 608K] [下载次数：157 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 董昊;高爽;宋倩;徐闯;孙旭东;
为了探讨乙酰乙酸(acetoacetic acid, ACAC)能否通过激活奶牛乳腺上皮细胞的未折叠蛋白反应(unfolded protein response, UPR)导致奶牛乳腺上皮细胞凋亡，试验用0,0.6,1.2,2.4 mmol/L的ACAC诱导MAC-T 24 h;或用500μg/mL牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid, TUDCA)预处理MAC-T 12 h后再加入1.2 mmol/L ACAC处理24 h。使用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测细胞凋亡率；通过实时荧光PCR方法检测凋亡相关基因[B淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl2)、Bcl2相关蛋白X(Bcl2 associated X,Bax)、半胱氨酸蛋白酶9(cysteine protease 9,Caspase9)和半胱氨酸蛋白酶3(cysteine protease 3,Caspase3)]与UPR相关基因[葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78 ku, GRP78)、激活转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)和X盒结合蛋白1s(X-box binding protein 1s, XBP1s]的相对表达量。结果表明：用0.6,1.2,2.4 mmol/L的ACAC处理MAC-T后，细胞凋亡率呈剂量依赖性升高；凋亡相关基因Bcl2表达下调，Bax、Caspase9、Caspase3表达上调；UPR的下游基因GRP78、ATF4和XBP1s表达上调。用TUDCA预处理后，缓解了ACAC导致的MAC-T凋亡相关基因和UPR下游基因表达的变化及细胞凋亡率升高。说明高浓度的ACAC通过UPR导致奶牛乳腺上皮细胞凋亡。
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为了探究Nesfatin-1对禁食小鼠多巴胺奖赏系统的影响，试验将40只C57BL/6小鼠随机分为阴性对照组、禁食24 h组、禁食48 h组、禁食24 h+Nesfatin-1组、禁食48 h+Nesfatin-1组，每组8只。禁食24 h、48 h组小鼠分别禁食24 h及48 h;禁食24 h+Nesfatin-1组及禁食48 h+Nesfatin-1组小鼠分别在禁食24 h及48 h基础上按体重120 mg/kg腹腔注射Nesfatin-1;阴性对照组小鼠腹腔注射等体积的PBS。注射Nesfatin-1后等待观察4 h,各组小鼠眼球采血后断颈处死，解剖取脑组织，采用ELISA方法检测各组小鼠血清Nesfatin-1及多巴胺含量；应用实时荧光定量PCR方法检测各组小鼠脑组织酪氨酸羟化酶(TH)基因和即刻早期基因(cFOS基因)的相对表达量。结果表明：与阴性对照组相比，禁食24 h组及禁食48 h组小鼠血清Nesfatin-1、多巴胺含量显著降低(P<0.05);与禁食24 h组相比，禁食24 h+Nesfatin-1组小鼠血清Nesfatin-1、多巴胺含量极显著升高(P<0.01);与禁食48 h组相比，禁食48 h+Nesfatin-1组小鼠血清Nesfatin-1、多巴胺含量极显著升高(P<0.01)。与阴性对照组相比，禁食24 h组及禁食48 h组小鼠脑组织TH基因的相对表达量极显著下降(P<0.01),cFOS基因的相对表达量极显著升高(P<0.01);与禁食24 h组相比，禁食24 h+Nesfatin-1组小鼠脑组织TH及cFOS基因相对表达量极显著升高(P<0.01);与禁食48 h组相比，禁食48 h+Nesfatin-1组小鼠脑组织TH及cFOS基因相对表达量显著升高(P<0.05)。说明Nesfatin-1对禁食小鼠多巴胺奖赏系统有一定影响。
2023年19期 No.679 8-12页 [查看摘要][在线阅读][下载 290K] [下载次数：158 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 罗雨晨;么宏强;谢志凤;陈宇飞;王铭;玉斯日古楞;
为了探究Nesfatin-1对禁食小鼠多巴胺奖赏系统的影响，试验将40只C57BL/6小鼠随机分为阴性对照组、禁食24 h组、禁食48 h组、禁食24 h+Nesfatin-1组、禁食48 h+Nesfatin-1组，每组8只。禁食24 h、48 h组小鼠分别禁食24 h及48 h;禁食24 h+Nesfatin-1组及禁食48 h+Nesfatin-1组小鼠分别在禁食24 h及48 h基础上按体重120 mg/kg腹腔注射Nesfatin-1;阴性对照组小鼠腹腔注射等体积的PBS。注射Nesfatin-1后等待观察4 h,各组小鼠眼球采血后断颈处死，解剖取脑组织，采用ELISA方法检测各组小鼠血清Nesfatin-1及多巴胺含量；应用实时荧光定量PCR方法检测各组小鼠脑组织酪氨酸羟化酶(TH)基因和即刻早期基因(cFOS基因)的相对表达量。结果表明：与阴性对照组相比，禁食24 h组及禁食48 h组小鼠血清Nesfatin-1、多巴胺含量显著降低(P<0.05);与禁食24 h组相比，禁食24 h+Nesfatin-1组小鼠血清Nesfatin-1、多巴胺含量极显著升高(P<0.01);与禁食48 h组相比，禁食48 h+Nesfatin-1组小鼠血清Nesfatin-1、多巴胺含量极显著升高(P<0.01)。与阴性对照组相比，禁食24 h组及禁食48 h组小鼠脑组织TH基因的相对表达量极显著下降(P<0.01),cFOS基因的相对表达量极显著升高(P<0.01);与禁食24 h组相比，禁食24 h+Nesfatin-1组小鼠脑组织TH及cFOS基因相对表达量极显著升高(P<0.01);与禁食48 h组相比，禁食48 h+Nesfatin-1组小鼠脑组织TH及cFOS基因相对表达量显著升高(P<0.05)。说明Nesfatin-1对禁食小鼠多巴胺奖赏系统有一定影响。
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为了建立高效率的病毒包装体系，完善研究蒙古马相关基因功能的基础手段，试验采用脂质体3000和脂质体LTX两种试剂对编码绿色荧光蛋白基因的慢病毒质粒的转染效率和慢病毒感染效率进行比较，并使用其中转染效率和感染效率较优的脂质体进一步感染马胚胎成纤维细胞。结果表明：脂质体3000与脂质体LTX对编码绿色荧光蛋白基因的慢病毒质粒转染效率分别为(79.4±6.3)%和(74.6±6.2)%;脂质体3000与脂质体LTX包装病毒液后感染293T细胞的感染效率分别为(74.0±3.6)%和(69.2±3.4)%。两者之间的转染效率及感染效率均差异不显著(P>0.05),都可以有效改善病毒的感染，其中脂质体3000的应用效果更好，脂质体3000可成功感染马胚胎成纤维细胞，感染效率为(69.4±6.4)%。说明脂质体3000可以高效率包装慢病毒，并可用于感染马胚胎成纤维细胞。
2023年19期 No.679 13-16+136页 [查看摘要][在线阅读][下载 352K] [下载次数：319 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 才文道力玛;伊敏娜;神英超;赵比力格;王敏;格日乐其木格;芒来;
为了建立高效率的病毒包装体系，完善研究蒙古马相关基因功能的基础手段，试验采用脂质体3000和脂质体LTX两种试剂对编码绿色荧光蛋白基因的慢病毒质粒的转染效率和慢病毒感染效率进行比较，并使用其中转染效率和感染效率较优的脂质体进一步感染马胚胎成纤维细胞。结果表明：脂质体3000与脂质体LTX对编码绿色荧光蛋白基因的慢病毒质粒转染效率分别为(79.4±6.3)%和(74.6±6.2)%;脂质体3000与脂质体LTX包装病毒液后感染293T细胞的感染效率分别为(74.0±3.6)%和(69.2±3.4)%。两者之间的转染效率及感染效率均差异不显著(P>0.05),都可以有效改善病毒的感染，其中脂质体3000的应用效果更好，脂质体3000可成功感染马胚胎成纤维细胞，感染效率为(69.4±6.4)%。说明脂质体3000可以高效率包装慢病毒，并可用于感染马胚胎成纤维细胞。
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为了验证miR-21a-5p与CCL1基因的靶向关系，试验利用生物信息学软件预测miR-21a-5p和CCL1基因的结合位点，设计引物合成CCL1基因3′非翻译区(UTR)野生型及突变型目的片段，并将其克隆到psiCHECK2质粒上构建CCL1野生型(CCL1-WT)和突变型(CCL1-MUT)双荧光素酶报告质粒。将构建好的CCL1-WT和CCL1-MUT分别与miR-21a-5p模拟物(miR-21a-5p mimic)和阴性对照(miR-NC)共同转染到293T细胞中，检测CCL1-WT+miR-NC组、CCL1-WT+miR-21a-5p mimic组、CCL1-MUT+miR-NC组、CCL1-MUT+miR-21a-5p mimic组的荧光素酶活性。结果表明：CCL1基因是miR-21a-5p的潜在靶基因；CCL1野生型和突变型双荧光素酶报告质粒测序结果与预期结果一致；与CCL1-WT+miR-NC组相比，CCL1-WT+miR-21a-5p mimic组荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而CCL1-MUT+miR-NC组与CCL1-MUT+miR-21a-5p mimic组之间差异不显著(P>0.05)。说明CCL1基因野生型及突变型双荧光素酶报告质粒构建成功，且miR-21a-5p与CCL1基因存在靶向关系。
2023年19期 No.679 17-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 362K] [下载次数：688 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 闫雪琪;陈明杰;齐亚银;任静静;
为了验证miR-21a-5p与CCL1基因的靶向关系，试验利用生物信息学软件预测miR-21a-5p和CCL1基因的结合位点，设计引物合成CCL1基因3′非翻译区(UTR)野生型及突变型目的片段，并将其克隆到psiCHECK2质粒上构建CCL1野生型(CCL1-WT)和突变型(CCL1-MUT)双荧光素酶报告质粒。将构建好的CCL1-WT和CCL1-MUT分别与miR-21a-5p模拟物(miR-21a-5p mimic)和阴性对照(miR-NC)共同转染到293T细胞中，检测CCL1-WT+miR-NC组、CCL1-WT+miR-21a-5p mimic组、CCL1-MUT+miR-NC组、CCL1-MUT+miR-21a-5p mimic组的荧光素酶活性。结果表明：CCL1基因是miR-21a-5p的潜在靶基因；CCL1野生型和突变型双荧光素酶报告质粒测序结果与预期结果一致；与CCL1-WT+miR-NC组相比，CCL1-WT+miR-21a-5p mimic组荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而CCL1-MUT+miR-NC组与CCL1-MUT+miR-21a-5p mimic组之间差异不显著(P>0.05)。说明CCL1基因野生型及突变型双荧光素酶报告质粒构建成功，且miR-21a-5p与CCL1基因存在靶向关系。
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- 蒋宇轩;袁琳;路娟娥;张悦;辛圆;吴昊;
近年来，多重耐药革兰氏阴性菌(MDR-GNB)感染已在全球范围内严重威胁人类健康。氨基糖苷类、喹诺酮类和氯霉素类等临床常用的抗革兰氏阴性菌药物在治疗MDR-GNB方面的效果逐渐减弱。黏菌素(多黏菌素E)作为目前临床治疗MDR-GNB的“最后一线”药物，其重要性日益提高。然而，由于黏菌素在动物养殖业中作为饲料添加剂被广泛使用，导致黏菌素耐药基因mcr-1的出现。mcr-1基因在全球范围内快速传播，引发了大规模黏菌素耐药问题。文章从mcr-1基因的传播机制、携带率变化和适应性代价等方面进行综述，以期为更好地应对黏菌素耐药问题提供参考。
2023年19期 No.679 22-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 241K] [下载次数：373 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：0 ] - 蒋宇轩;袁琳;路娟娥;张悦;辛圆;吴昊;
近年来，多重耐药革兰氏阴性菌(MDR-GNB)感染已在全球范围内严重威胁人类健康。氨基糖苷类、喹诺酮类和氯霉素类等临床常用的抗革兰氏阴性菌药物在治疗MDR-GNB方面的效果逐渐减弱。黏菌素(多黏菌素E)作为目前临床治疗MDR-GNB的“最后一线”药物，其重要性日益提高。然而，由于黏菌素在动物养殖业中作为饲料添加剂被广泛使用，导致黏菌素耐药基因mcr-1的出现。mcr-1基因在全球范围内快速传播，引发了大规模黏菌素耐药问题。文章从mcr-1基因的传播机制、携带率变化和适应性代价等方面进行综述，以期为更好地应对黏菌素耐药问题提供参考。
2023年19期 No.679 22-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 241K] [下载次数：373 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：0 ] - 曹兴旺;李益涛;徐道元;付祥益宁;何欣;陈扬;田美卉;王超丽;霍明凯;肖陈城;李亚玲;
多黏菌素是治疗多重耐药革兰氏阴性菌感染的“最后一道防线”,然而质粒介导的多黏菌素抗性基因mcr-1及其变异体在全球传播，给畜牧业健康发展和人类公共卫生安全带来了严重挑战。文章综述了mcr-1基因的发现、结构和流行情况，mcr-1基因变异体、流行特征以及防治策略等的研究进展，以期为相关科研人员和临床工作者提供参考，共同应对抗生素耐药日益严峻的局面。
2023年19期 No.679 29-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 298K] [下载次数：399 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 曹兴旺;李益涛;徐道元;付祥益宁;何欣;陈扬;田美卉;王超丽;霍明凯;肖陈城;李亚玲;
多黏菌素是治疗多重耐药革兰氏阴性菌感染的“最后一道防线”,然而质粒介导的多黏菌素抗性基因mcr-1及其变异体在全球传播，给畜牧业健康发展和人类公共卫生安全带来了严重挑战。文章综述了mcr-1基因的发现、结构和流行情况，mcr-1基因变异体、流行特征以及防治策略等的研究进展，以期为相关科研人员和临床工作者提供参考，共同应对抗生素耐药日益严峻的局面。
2023年19期 No.679 29-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 298K] [下载次数：399 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：0 ] - 李宸葳;李天顺;王佳;朱龙佼;李相阳;许文涛;
磺胺类抗菌药用于临床已经有80多年的历史，具有广谱、稳定、价格低廉等优点，目前仍然是被广泛使用的化学治疗药物。但磺胺类抗菌药的滥用极易诱导细菌产生耐药性，其在农产品、环境中的残留不仅对人体健康产生影响，对环境的潜在危害也不可小觑。实现磺胺类抗菌药的准确、快速检测对控制其引起的风险具有十分重要的意义。适配体作为分子识别元件，具有高特异性、高稳定性、易于合成和修饰的优点，在磺胺类抗菌药快速检测应用中表现出极大的潜力。文章系统总结了以磺胺类抗菌药作为靶标的适配体筛选方法，阐述了适配体与抗菌药分子结合机制，并根据不同的信号输出方式，系统回顾了基于适配体的磺胺类抗菌药生物传感器的构建，以期能为磺胺类抗菌药残留的检测提供更多有益的参考。
2023年19期 No.679 37-44+48+137页 [查看摘要][在线阅读][下载 821K] [下载次数：466 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 李宸葳;李天顺;王佳;朱龙佼;李相阳;许文涛;
磺胺类抗菌药用于临床已经有80多年的历史，具有广谱、稳定、价格低廉等优点，目前仍然是被广泛使用的化学治疗药物。但磺胺类抗菌药的滥用极易诱导细菌产生耐药性，其在农产品、环境中的残留不仅对人体健康产生影响，对环境的潜在危害也不可小觑。实现磺胺类抗菌药的准确、快速检测对控制其引起的风险具有十分重要的意义。适配体作为分子识别元件，具有高特异性、高稳定性、易于合成和修饰的优点，在磺胺类抗菌药快速检测应用中表现出极大的潜力。文章系统总结了以磺胺类抗菌药作为靶标的适配体筛选方法，阐述了适配体与抗菌药分子结合机制，并根据不同的信号输出方式，系统回顾了基于适配体的磺胺类抗菌药生物传感器的构建，以期能为磺胺类抗菌药残留的检测提供更多有益的参考。
2023年19期 No.679 37-44+48+137页 [查看摘要][在线阅读][下载 821K] [下载次数：466 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：2 ] - 李昌泽;陈新源;李钇丹;张爱武;
鹿茸是指梅花鹿或马鹿的雄鹿未骨化而带茸毛的幼角。鹿茸中含有10余种氨基酸、20多种微量元素，以及多糖类、磷脂类、核酸类、激素类等有机化合物。鹿茸具有抗炎症、抗疲劳、抗氧化、抗骨质疏松、增强免疫力等功效。文章对近年来鹿茸的化学成分和药理作用进行了综述，并对未来的研究应用前景进行了展望，以期为鹿茸研究活性成分和开发中成药或保健品提供理论依据。
2023年19期 No.679 45-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 185K] [下载次数：2251 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：38 ] |[阅读次数：0 ] - 李昌泽;陈新源;李钇丹;张爱武;
鹿茸是指梅花鹿或马鹿的雄鹿未骨化而带茸毛的幼角。鹿茸中含有10余种氨基酸、20多种微量元素，以及多糖类、磷脂类、核酸类、激素类等有机化合物。鹿茸具有抗炎症、抗疲劳、抗氧化、抗骨质疏松、增强免疫力等功效。文章对近年来鹿茸的化学成分和药理作用进行了综述，并对未来的研究应用前景进行了展望，以期为鹿茸研究活性成分和开发中成药或保健品提供理论依据。
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- 何莉莉;何兆华;赵芳芳;王继卿;刘秀;李少斌;
为了构建甘肃高山细毛羊的产毛量估测模型，试验选取73只12月龄母羊测量可以提前且容易检测的产毛量(y)、体重(x_1)、体高(x_2)、体斜长(x_3)、胸围(x_4)、羊毛长度(x_5)和羊毛纤维直径(x_6)等性状，筛选其中与产毛量相关性强的性状建立回归方程，从而估测产毛量。结果表明：体重和羊毛长度对甘肃高山细毛羊产毛量产生极显著影响(P<0.01),对产毛量的皮尔森相关系数分别为0.399和0.300。体重和羊毛长度通过直接作用对产毛量产生影响，而体斜长和胸围通过辅助其他性状对产毛量产生间接作用。甘肃高山细毛羊所测性状对产毛量的最优回归方程为y=-1.022+0.067x_1+0.213x_5,R值为0.539,F值为14.365,达到极显著水平(P<0.01)。说明试验构建的回归方程所选的体重与羊毛长度指标对产毛量具有决定性作用，对指导实际生产工作有一定的参考价值。
2023年19期 No.679 49-52页 [查看摘要][在线阅读][下载 180K] [下载次数：108 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 何莉莉;何兆华;赵芳芳;王继卿;刘秀;李少斌;
为了构建甘肃高山细毛羊的产毛量估测模型，试验选取73只12月龄母羊测量可以提前且容易检测的产毛量(y)、体重(x_1)、体高(x_2)、体斜长(x_3)、胸围(x_4)、羊毛长度(x_5)和羊毛纤维直径(x_6)等性状，筛选其中与产毛量相关性强的性状建立回归方程，从而估测产毛量。结果表明：体重和羊毛长度对甘肃高山细毛羊产毛量产生极显著影响(P<0.01),对产毛量的皮尔森相关系数分别为0.399和0.300。体重和羊毛长度通过直接作用对产毛量产生影响，而体斜长和胸围通过辅助其他性状对产毛量产生间接作用。甘肃高山细毛羊所测性状对产毛量的最优回归方程为y=-1.022+0.067x_1+0.213x_5,R值为0.539,F值为14.365,达到极显著水平(P<0.01)。说明试验构建的回归方程所选的体重与羊毛长度指标对产毛量具有决定性作用，对指导实际生产工作有一定的参考价值。
2023年19期 No.679 49-52页 [查看摘要][在线阅读][下载 180K] [下载次数：108 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 袁利明;陈云蕾;刘欣杰;赛务加甫;
为了探索PLC-γ1基因在哈萨克绵羊不同器官和淋巴组织中的表达差异，试验随机选取6月龄健康的哈萨克绵羊雌雄各5只，进行屠宰，采集样本采用实时荧光定量PCR方法对PLC-γ1基因在哈萨克绵羊不同器官(脾脏、肺脏、胰腺、肾脏、心脏、肝脏、睾丸、卵巢、子宫)及淋巴组织(颈前淋巴、肩前淋巴、网胃淋巴、瓣胃淋巴、瘤胃淋巴、肠系淋巴、十二指肠淋巴、腹股沟淋巴、空肠淋巴和回盲淋巴)的表达规律进行研究。结果表明：哈萨克绵羊胰腺PLC-γ1基因的相对表达量极显著高于其他器官(P<0.01),卵巢PLC-γ1基因的相对表达量显著高于肾脏和子宫(P<0.05),其余器官PLC-γ1基因相对表达量均差异不显著(P>0.05);十二指肠淋巴PLC-γ1基因的相对表达量显著高于瓣胃淋巴(P<0.05),瓣胃淋巴PLC-γ1基因的相对表达量极显著高于其他淋巴组织(P<0.01)。说明PLC-γ1基因在哈萨克绵羊各系统器官和淋巴组织中均有表达，并且在胰腺、卵巢、十二指肠淋巴、瓣胃淋巴中的表达明显，对机体免疫、生殖和消化等方面具有重要作用。
2023年19期 No.679 53-56+61+137页 [查看摘要][在线阅读][下载 465K] [下载次数：74 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 袁利明;陈云蕾;刘欣杰;赛务加甫;
为了探索PLC-γ1基因在哈萨克绵羊不同器官和淋巴组织中的表达差异，试验随机选取6月龄健康的哈萨克绵羊雌雄各5只，进行屠宰，采集样本采用实时荧光定量PCR方法对PLC-γ1基因在哈萨克绵羊不同器官(脾脏、肺脏、胰腺、肾脏、心脏、肝脏、睾丸、卵巢、子宫)及淋巴组织(颈前淋巴、肩前淋巴、网胃淋巴、瓣胃淋巴、瘤胃淋巴、肠系淋巴、十二指肠淋巴、腹股沟淋巴、空肠淋巴和回盲淋巴)的表达规律进行研究。结果表明：哈萨克绵羊胰腺PLC-γ1基因的相对表达量极显著高于其他器官(P<0.01),卵巢PLC-γ1基因的相对表达量显著高于肾脏和子宫(P<0.05),其余器官PLC-γ1基因相对表达量均差异不显著(P>0.05);十二指肠淋巴PLC-γ1基因的相对表达量显著高于瓣胃淋巴(P<0.05),瓣胃淋巴PLC-γ1基因的相对表达量极显著高于其他淋巴组织(P<0.01)。说明PLC-γ1基因在哈萨克绵羊各系统器官和淋巴组织中均有表达，并且在胰腺、卵巢、十二指肠淋巴、瓣胃淋巴中的表达明显，对机体免疫、生殖和消化等方面具有重要作用。
2023年19期 No.679 53-56+61+137页 [查看摘要][在线阅读][下载 465K] [下载次数：74 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 彭莹琼;洪恩松;邓泓;何雯洁;赵雷;
为了快速鉴别猪肋骨种类，从而选取最佳的育种猪进行繁殖改良，提高食用猪的肉质及体长，试验进行了猪肋骨种类判断(多肋骨/非多肋骨)研究，即首先制作出猪肋骨图像数据集，然后通过迁移学习和特征融合方法对猪肋骨数据图像进行训练、验证、测试和评估，并且与深度学习方法VGG16、AlexNet、MobileNetV2、DenseNet、InceptionV3进行对比分析，最后通过热力图展示特征响应部位与强弱。结果表明：基于迁移学习和特征融合的猪肋骨种类判断算法能够提取到关键信息，与深度学习方法比较其准确率、损失值、均方根误差、精确率、召回率和平衡F分数均为最优，分别为0.994,0.028,0.078,0.994,0.976,0.985。说明在图像识别过程中，引入迁移学习和特征融合可以提取并融合关键部位的特征信息，提高鉴别能力。
2023年19期 No.679 57-61+138页 [查看摘要][在线阅读][下载 601K] [下载次数：191 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 彭莹琼;洪恩松;邓泓;何雯洁;赵雷;
为了快速鉴别猪肋骨种类，从而选取最佳的育种猪进行繁殖改良，提高食用猪的肉质及体长，试验进行了猪肋骨种类判断(多肋骨/非多肋骨)研究，即首先制作出猪肋骨图像数据集，然后通过迁移学习和特征融合方法对猪肋骨数据图像进行训练、验证、测试和评估，并且与深度学习方法VGG16、AlexNet、MobileNetV2、DenseNet、InceptionV3进行对比分析，最后通过热力图展示特征响应部位与强弱。结果表明：基于迁移学习和特征融合的猪肋骨种类判断算法能够提取到关键信息，与深度学习方法比较其准确率、损失值、均方根误差、精确率、召回率和平衡F分数均为最优，分别为0.994,0.028,0.078,0.994,0.976,0.985。说明在图像识别过程中，引入迁移学习和特征融合可以提取并融合关键部位的特征信息，提高鉴别能力。
2023年19期 No.679 57-61+138页 [查看摘要][在线阅读][下载 601K] [下载次数：191 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 毛敏;林雅婷;伍翠莹;李耀坤;刘德武;柳广斌;
为了探讨不同预处理及分离方法提取山羊血浆外泌体的效果，试验利用过滤膜对采集的血浆样品进行预处理后分为0.22μm过滤组、0.45μm过滤组和0.80μm过滤组，同时设置未过滤组，然后采用超速离心法和试剂盒法提取不同预处理组的血浆外泌体，通过透射电子显微镜、纳米粒径分析仪及Western-blot方法对血浆外泌体的形态、大小及标志蛋白的表达进行分析。结果表明：超速离心法和试剂盒法提取的血浆外泌体的粒径大部分分布在30～200 nm之间；外泌体的结构完整，大小不一，呈圆盘状或茶托样，并且0.22μm过滤组采用超速离心法提取的外泌体在透射电子显微镜下的形态最清晰；0.80μm过滤组采用试剂盒法提取的血浆外泌体纳米粒径显著大于超速离心法(P<0.05),未过滤组及不同过滤组采用试剂盒法提取的血浆外泌体蛋白浓度显著高于超速离心法(P<0.05);不同预处理及分离方法提取的血浆外泌体表面均有标志蛋白TSG101、CD63、CD9的表达。说明经0.22μm过滤膜预处理并结合超速离心法提取的血浆外泌体纯度最高，经0.80μm过滤膜预处理并结合试剂盒法提取的血浆外泌体产量最高。
2023年19期 No.679 62-65+139页 [查看摘要][在线阅读][下载 392K] [下载次数：385 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：2 ] - 毛敏;林雅婷;伍翠莹;李耀坤;刘德武;柳广斌;
为了探讨不同预处理及分离方法提取山羊血浆外泌体的效果，试验利用过滤膜对采集的血浆样品进行预处理后分为0.22μm过滤组、0.45μm过滤组和0.80μm过滤组，同时设置未过滤组，然后采用超速离心法和试剂盒法提取不同预处理组的血浆外泌体，通过透射电子显微镜、纳米粒径分析仪及Western-blot方法对血浆外泌体的形态、大小及标志蛋白的表达进行分析。结果表明：超速离心法和试剂盒法提取的血浆外泌体的粒径大部分分布在30～200 nm之间；外泌体的结构完整，大小不一，呈圆盘状或茶托样，并且0.22μm过滤组采用超速离心法提取的外泌体在透射电子显微镜下的形态最清晰；0.80μm过滤组采用试剂盒法提取的血浆外泌体纳米粒径显著大于超速离心法(P<0.05),未过滤组及不同过滤组采用试剂盒法提取的血浆外泌体蛋白浓度显著高于超速离心法(P<0.05);不同预处理及分离方法提取的血浆外泌体表面均有标志蛋白TSG101、CD63、CD9的表达。说明经0.22μm过滤膜预处理并结合超速离心法提取的血浆外泌体纯度最高，经0.80μm过滤膜预处理并结合试剂盒法提取的血浆外泌体产量最高。
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- 毛晓伟;孙柯;石雅琴;穆嘉明;王文龙;呼和巴特尔;
为了区分布鲁氏菌S2疫苗株和布鲁氏菌野毒株，试验通过比对NCBI上公布的布鲁氏菌S2疫苗株和M28野毒株全基因组序列，筛选出S2疫苗株特有基因GL＿0002189,对该基因进行克隆、原核表达及蛋白质纯化，以纯化的重组蛋白作为抗原建立间接ELISA检测方法，对该方法的反应条件进行优化后确定判定点，同时对建立的间接ELISA检测方法进行重复性验证、特异性和敏感性试验，并对部分曾接种过布鲁氏菌S2疫苗的83份牛血清进行检测。结果表明：重组蛋白GL＿0002189同时以可溶形式和包涵体形式表达，经纯化得到大小为29.2 ku的重组蛋白；在建立的间接ELISA检测方法中，最适重组蛋白包被浓度为2.5 ng/μL,最适血清稀释度为1∶100,最佳酶标二抗稀释度为1∶5 000,判定点为0.586,该方法的特异性为95.0%,敏感性为93.3%,且具有较好的重复性。利用建立的间接ELISA检测方法对83份牛血清进行检测，检出率为7.2%。说明试验建立的间接ELISA检测方法可区分布鲁氏菌S2疫苗免疫牛血清和布鲁氏菌野毒感染牛血清。
2023年19期 No.679 66-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 239K] [下载次数：352 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 毛晓伟;孙柯;石雅琴;穆嘉明;王文龙;呼和巴特尔;
为了区分布鲁氏菌S2疫苗株和布鲁氏菌野毒株，试验通过比对NCBI上公布的布鲁氏菌S2疫苗株和M28野毒株全基因组序列，筛选出S2疫苗株特有基因GL＿0002189,对该基因进行克隆、原核表达及蛋白质纯化，以纯化的重组蛋白作为抗原建立间接ELISA检测方法，对该方法的反应条件进行优化后确定判定点，同时对建立的间接ELISA检测方法进行重复性验证、特异性和敏感性试验，并对部分曾接种过布鲁氏菌S2疫苗的83份牛血清进行检测。结果表明：重组蛋白GL＿0002189同时以可溶形式和包涵体形式表达，经纯化得到大小为29.2 ku的重组蛋白；在建立的间接ELISA检测方法中，最适重组蛋白包被浓度为2.5 ng/μL,最适血清稀释度为1∶100,最佳酶标二抗稀释度为1∶5 000,判定点为0.586,该方法的特异性为95.0%,敏感性为93.3%,且具有较好的重复性。利用建立的间接ELISA检测方法对83份牛血清进行检测，检出率为7.2%。说明试验建立的间接ELISA检测方法可区分布鲁氏菌S2疫苗免疫牛血清和布鲁氏菌野毒感染牛血清。
2023年19期 No.679 66-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 239K] [下载次数：352 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 徐赵玉;任立松;岳海涛;杨洁;
为了获得高纯度牛布鲁氏菌VirB12蛋白及其抗原表位蛋白VB-BW,试验采用生物信息学方法对牛布鲁氏菌VirB12蛋白的理化性质、空间结构、信号肽、结构域、跨膜结构、磷酸化位点、抗原表位等进行预测，在此基础上设计抗原表位蛋白VB-BW;VirB12与VB-BW基因经PCR扩增后与pGEX4T-1载体连接，并转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达蛋白；经His-Trap HP亲和纯化后对VirB12与VB-BW蛋白进行SDS-PAGE分析与Western-blot鉴定。结果表明：VirB12蛋白由172个氨基酸组成，理论等电点为10.28,脂肪族氨基酸占比较高，半衰期大于10 h; α-螺旋、β-转角、β-折叠与无规则卷曲结构占总蛋白的比例分别为38.95%、4.07%、13.95%与43.02%;含有15个氨基酸组成LIPO型信号肽与一个OmpA同源区域；无跨膜结构；有13个磷酸化位点；含有7个优势B淋巴细胞抗原表位与4个优势T淋巴细胞抗原表位；设计出的抗原表位蛋白VB-BW共有79个氨基酸，由VirB12蛋白的第67～97位与第130～172位氨基酸经刚性连接子连接组成。扩增出的VirB12与VB-BW基因大小为561 bp与270 bp;重组表达载体BL21-VB和BL21-BW在诱导剂IPTG浓度为0.2 mmol/L、诱导时间为10小时时表达出的VirB12与VB-BW蛋白含量最高，经纯化后最终获得大小为47.7 ku与36.3 ku的VirB12与VB-BW蛋白。说明试验构建出表达VirB12与VB-BW蛋白的原核表达体系。
2023年19期 No.679 72-81+140页 [查看摘要][在线阅读][下载 1260K] [下载次数：379 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 徐赵玉;任立松;岳海涛;杨洁;
为了获得高纯度牛布鲁氏菌VirB12蛋白及其抗原表位蛋白VB-BW,试验采用生物信息学方法对牛布鲁氏菌VirB12蛋白的理化性质、空间结构、信号肽、结构域、跨膜结构、磷酸化位点、抗原表位等进行预测，在此基础上设计抗原表位蛋白VB-BW;VirB12与VB-BW基因经PCR扩增后与pGEX4T-1载体连接，并转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达蛋白；经His-Trap HP亲和纯化后对VirB12与VB-BW蛋白进行SDS-PAGE分析与Western-blot鉴定。结果表明：VirB12蛋白由172个氨基酸组成，理论等电点为10.28,脂肪族氨基酸占比较高，半衰期大于10 h; α-螺旋、β-转角、β-折叠与无规则卷曲结构占总蛋白的比例分别为38.95%、4.07%、13.95%与43.02%;含有15个氨基酸组成LIPO型信号肽与一个OmpA同源区域；无跨膜结构；有13个磷酸化位点；含有7个优势B淋巴细胞抗原表位与4个优势T淋巴细胞抗原表位；设计出的抗原表位蛋白VB-BW共有79个氨基酸，由VirB12蛋白的第67～97位与第130～172位氨基酸经刚性连接子连接组成。扩增出的VirB12与VB-BW基因大小为561 bp与270 bp;重组表达载体BL21-VB和BL21-BW在诱导剂IPTG浓度为0.2 mmol/L、诱导时间为10小时时表达出的VirB12与VB-BW蛋白含量最高，经纯化后最终获得大小为47.7 ku与36.3 ku的VirB12与VB-BW蛋白。说明试验构建出表达VirB12与VB-BW蛋白的原核表达体系。
2023年19期 No.679 72-81+140页 [查看摘要][在线阅读][下载 1260K] [下载次数：379 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 梁彤;曹存;于德斌;王芳;姜志刚;徐晓静;刘春东;尹鑫;常继涛;
为了对内蒙古地区患腹泻疾病的犊牛进行病原学鉴定，并进一步丰富我国牛冠状病毒(BCoV)的种质资源和流行病学数据，试验采用PCR扩增、间接免疫荧光试验、增殖动态检测、透射电镜观察等方法确定9份新生犊牛腹泻粪便样本的病原学特征，同时通过序列比对分析与GenBank中具有代表性的BCoV S1基因组序列的同源性，利用MEGA 7.0.14软件构建S1基因组系统进化树。结果表明：9份样本中有2份为BCoV N基因阳性，PCR扩增得到大小约为730 bp的目的条带；用阳性样本接种HRT-18G细胞并进行3次传代培养，可见细胞出现以变圆、融合形成合胞体、融合细胞脱落为主要特征的典型细胞病变；分离株能够与兔抗BCoV N蛋白的多克隆抗体发生特异性反应，透射电镜观察可见有囊膜、表面有纤突、直径约为120 nm的病毒粒子；将分离获得的BCoV毒株命名为HM-XC,该分离株感染HRT-18G细胞的病毒含量为1×10~(5.75) TCID_(50)/0.1 mL;分离株HM-XC S1基因的核苷酸序列与我国青海省牦牛源毒株BCoV Yak/BCoV-China/QH1的相似性最高，为99.61%,与近年来辽宁省流行毒株的相似性为96.4%～99.0%,与美国经典参考毒株BCoV Mebus的相似性较低，为96.3%;与相似性最高的Yak/BCoV-China/QH1毒株相比，分离株HM-XC的S1蛋白存在7个氨基酸突变，分别是H115D、S186W、Y509H、V528A、N531D、L563S和I640T。说明内蒙古地区牛场中已有BCoV的流行，并且在犊牛腹泻粪便中分离获得BCoV内蒙古流行毒株，分离株具有我国新流行BCoV株的序列特征。
2023年19期 No.679 82-87+141页 [查看摘要][在线阅读][下载 621K] [下载次数：779 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：0 ] - 梁彤;曹存;于德斌;王芳;姜志刚;徐晓静;刘春东;尹鑫;常继涛;
为了对内蒙古地区患腹泻疾病的犊牛进行病原学鉴定，并进一步丰富我国牛冠状病毒(BCoV)的种质资源和流行病学数据，试验采用PCR扩增、间接免疫荧光试验、增殖动态检测、透射电镜观察等方法确定9份新生犊牛腹泻粪便样本的病原学特征，同时通过序列比对分析与GenBank中具有代表性的BCoV S1基因组序列的同源性，利用MEGA 7.0.14软件构建S1基因组系统进化树。结果表明：9份样本中有2份为BCoV N基因阳性，PCR扩增得到大小约为730 bp的目的条带；用阳性样本接种HRT-18G细胞并进行3次传代培养，可见细胞出现以变圆、融合形成合胞体、融合细胞脱落为主要特征的典型细胞病变；分离株能够与兔抗BCoV N蛋白的多克隆抗体发生特异性反应，透射电镜观察可见有囊膜、表面有纤突、直径约为120 nm的病毒粒子；将分离获得的BCoV毒株命名为HM-XC,该分离株感染HRT-18G细胞的病毒含量为1×10~(5.75) TCID_(50)/0.1 mL;分离株HM-XC S1基因的核苷酸序列与我国青海省牦牛源毒株BCoV Yak/BCoV-China/QH1的相似性最高，为99.61%,与近年来辽宁省流行毒株的相似性为96.4%～99.0%,与美国经典参考毒株BCoV Mebus的相似性较低，为96.3%;与相似性最高的Yak/BCoV-China/QH1毒株相比，分离株HM-XC的S1蛋白存在7个氨基酸突变，分别是H115D、S186W、Y509H、V528A、N531D、L563S和I640T。说明内蒙古地区牛场中已有BCoV的流行，并且在犊牛腹泻粪便中分离获得BCoV内蒙古流行毒株，分离株具有我国新流行BCoV株的序列特征。
2023年19期 No.679 82-87+141页 [查看摘要][在线阅读][下载 621K] [下载次数：779 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：1 ] - 胡晓坤;钟如婷;麦湛卓;罗依琢;蔡孟楷;李美娣;贾聪俊;张梦玲;龚浪;张桂红;
为了调查猪流感病毒(swine Influenza virus, SIV)在我国中南地区猪场的流行情况，试验采用血凝抑制(HI)试验对2017年7月份—2020年9月份采集的5 514份猪血清样品进行抗体阳性率的测定，并通过GraphPad Prism 8软件对抗体阳性结果进行了不同季节、猪群、地区的统计分析。结果表明：血清抗体总阳性率为56.31%,其中欧亚类禽H1N1亚型猪流感病毒(EA1 H1N1 SIV)的抗体阳性率最高，为31.19%,H3N2、EA2 H1N1、pdm09 H1N1、CS H1N1、H9N2和H4N8 SIV的抗体阳性率分别为19.15%、11.72%、13.78%、7.22%、1.31%和0.16%,未检测到H5N1、H6N6、H7N9亚型抗体，在猪群中不同亚型和不同分支的SIV混合感染情况较为普遍。EA1 H1N1 SIV在春冬季节较为流行，pdm09 H1N1 SIV在春夏季节较为流行，EA2 H1N1和H3N2 SIV无明显的季节性变化。公猪的EA1 H1N1 SIV抗体阳性率显著高于仔猪及保育猪和母猪(P<0.05),母猪的pdm09 H1N1 SIV抗体阳性率显著高于仔猪及保育猪和公猪(P<0.05),仔猪及保育猪的H3N2 SIV抗体阳性率极显著高于母猪(P<0.01)。福建省的EA1 H1N1 SIV抗体阳性率最高，河南省的pdm09 H1N1 SIV抗体阳性率最高。说明SIV普遍存在于中南地区各猪场中。
2023年19期 No.679 88-92页 [查看摘要][在线阅读][下载 334K] [下载次数：269 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ] - 胡晓坤;钟如婷;麦湛卓;罗依琢;蔡孟楷;李美娣;贾聪俊;张梦玲;龚浪;张桂红;
为了调查猪流感病毒(swine Influenza virus, SIV)在我国中南地区猪场的流行情况，试验采用血凝抑制(HI)试验对2017年7月份—2020年9月份采集的5 514份猪血清样品进行抗体阳性率的测定，并通过GraphPad Prism 8软件对抗体阳性结果进行了不同季节、猪群、地区的统计分析。结果表明：血清抗体总阳性率为56.31%,其中欧亚类禽H1N1亚型猪流感病毒(EA1 H1N1 SIV)的抗体阳性率最高，为31.19%,H3N2、EA2 H1N1、pdm09 H1N1、CS H1N1、H9N2和H4N8 SIV的抗体阳性率分别为19.15%、11.72%、13.78%、7.22%、1.31%和0.16%,未检测到H5N1、H6N6、H7N9亚型抗体，在猪群中不同亚型和不同分支的SIV混合感染情况较为普遍。EA1 H1N1 SIV在春冬季节较为流行，pdm09 H1N1 SIV在春夏季节较为流行，EA2 H1N1和H3N2 SIV无明显的季节性变化。公猪的EA1 H1N1 SIV抗体阳性率显著高于仔猪及保育猪和母猪(P<0.05),母猪的pdm09 H1N1 SIV抗体阳性率显著高于仔猪及保育猪和公猪(P<0.05),仔猪及保育猪的H3N2 SIV抗体阳性率极显著高于母猪(P<0.01)。福建省的EA1 H1N1 SIV抗体阳性率最高，河南省的pdm09 H1N1 SIV抗体阳性率最高。说明SIV普遍存在于中南地区各猪场中。
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- 王娜;
为了寻找新的可用于制备仔猪发酵饲料的益生乳酸菌，试验采用MRS培养基从健康仔猪粪便中分离纯化乳酸菌，利用16S rDNA基因测序结合生理生化检测对所得菌株进行鉴定。在此基础上，将分离得到的益生乳酸菌与蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)PBC-1制成复合菌剂添加到基础日粮中制备发酵饲料。将120头体重相近的28日龄健康三元杂交断奶仔猪随机分为4组，分别为对照组及2%、5%、10%发酵饲料组，每组3个重复，每个重复10头。对照组饲喂基础日粮，2%、5%、10%发酵饲料组分别在基础日粮中添加2%、5%、10%的发酵饲料替代相应比例的基础日粮，预试期2 d,正试期28 d。试验结束后统计仔猪的平均日采食量、平均日增重及腹泻率，每头仔猪采血并分离血清，用相应试剂盒检测血清抗氧化指标、免疫指标及炎症因子。结果表明：从健康仔猪粪便中筛选得到1株干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus casei),命名为ZYSJ-2。与对照组相比，2%、5%和10%发酵饲料组仔猪平均日采食量差异不显著(P>0.05),但平均日增重均显著提高(P<0.05),仔猪腹泻率均显著下降(P<0.05)。仔猪的血清总抗氧化能力(T-AOC)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性均显著提高(P<0.05),血清丙二醛(MDA)浓度则显著降低(P<0.05)。2%、5%和10%发酵饲料组仔猪的血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)质量浓度均显著高于对照组(P<0.05),而炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)质量浓度则显著低于对照组(P<0.05)。说明筛选得到的ZYSJ-2能够用于制备猪发酵饲料，采用干酪乳酪杆菌ZYSJ-2与蜡样芽孢杆菌PBC-1制得的复合发酵饲料能够提高仔猪的生长性能，增强仔猪抗氧化能力与免疫力，提升仔猪健康水平，复合发酵饲料以5%比例与仔猪的基础日粮混合使用为宜。
2023年19期 No.679 93-99页 [查看摘要][在线阅读][下载 270K] [下载次数：387 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：16 ] |[阅读次数：0 ] - 王娜;
为了寻找新的可用于制备仔猪发酵饲料的益生乳酸菌，试验采用MRS培养基从健康仔猪粪便中分离纯化乳酸菌，利用16S rDNA基因测序结合生理生化检测对所得菌株进行鉴定。在此基础上，将分离得到的益生乳酸菌与蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)PBC-1制成复合菌剂添加到基础日粮中制备发酵饲料。将120头体重相近的28日龄健康三元杂交断奶仔猪随机分为4组，分别为对照组及2%、5%、10%发酵饲料组，每组3个重复，每个重复10头。对照组饲喂基础日粮，2%、5%、10%发酵饲料组分别在基础日粮中添加2%、5%、10%的发酵饲料替代相应比例的基础日粮，预试期2 d,正试期28 d。试验结束后统计仔猪的平均日采食量、平均日增重及腹泻率，每头仔猪采血并分离血清，用相应试剂盒检测血清抗氧化指标、免疫指标及炎症因子。结果表明：从健康仔猪粪便中筛选得到1株干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus casei),命名为ZYSJ-2。与对照组相比，2%、5%和10%发酵饲料组仔猪平均日采食量差异不显著(P>0.05),但平均日增重均显著提高(P<0.05),仔猪腹泻率均显著下降(P<0.05)。仔猪的血清总抗氧化能力(T-AOC)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性均显著提高(P<0.05),血清丙二醛(MDA)浓度则显著降低(P<0.05)。2%、5%和10%发酵饲料组仔猪的血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)质量浓度均显著高于对照组(P<0.05),而炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)质量浓度则显著低于对照组(P<0.05)。说明筛选得到的ZYSJ-2能够用于制备猪发酵饲料，采用干酪乳酪杆菌ZYSJ-2与蜡样芽孢杆菌PBC-1制得的复合发酵饲料能够提高仔猪的生长性能，增强仔猪抗氧化能力与免疫力，提升仔猪健康水平，复合发酵饲料以5%比例与仔猪的基础日粮混合使用为宜。
2023年19期 No.679 93-99页 [查看摘要][在线阅读][下载 270K] [下载次数：387 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：16 ] |[阅读次数：0 ] - 李文星;武迪;曲威;
为了解益生菌对断奶仔猪应激综合征的影响，研究通过计算机检索中国知网、万方、PubMed、Science Direct 4个数据库中2011年1月份—2023年1月份发表的相关文献，采用Meta分析方法，借助Review Manager 5.4软件计算断奶仔猪平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(FCR)、腹泻率、肠道大肠杆菌数量与乳酸杆菌数量六个指标的平均差(MD)与95%置信区间，最后分析纳入文献的异质性与发表偏倚。结果表明：与基础日粮相比，总体上益生菌干预可以极显著提高断奶仔猪ADG(P<0.01),MD=47.42 g, 95%置信区间为[37.14,57.70];极显著提高断奶仔猪ADFI(P<0.01),MD=20.36 g, 95%置信区间为[9.37,31.34];极显著降低断奶仔猪FCR(P<0.01),MD=-0.15,95%置信区间为[-0.20,-0.10];极显著降低断奶仔猪腹泻率(P<0.01),MD=-0.92%,95%置信区间为[-1.26,-0.58];极显著增加断奶仔猪肠道乳酸杆菌数量(P<0.01),MD=0.65 lg(N/g),95%置信区间为[0.20,1.10];同时极显著减少断奶仔猪大肠杆菌数量(P<0.01),MD=-7.95 lg(N/g),95%置信区间为[-10.67,-5.24]。文献敏感性分析结果较为可靠，具有一定的发表偏倚，但偏倚程度不明显，不同菌种间的结果存在差异。说明益生菌可以减少或避免断奶仔猪应激综合征的发生。
2023年19期 No.679 100-106+141页 [查看摘要][在线阅读][下载 582K] [下载次数：285 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 李文星;武迪;曲威;
为了解益生菌对断奶仔猪应激综合征的影响，研究通过计算机检索中国知网、万方、PubMed、Science Direct 4个数据库中2011年1月份—2023年1月份发表的相关文献，采用Meta分析方法，借助Review Manager 5.4软件计算断奶仔猪平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(FCR)、腹泻率、肠道大肠杆菌数量与乳酸杆菌数量六个指标的平均差(MD)与95%置信区间，最后分析纳入文献的异质性与发表偏倚。结果表明：与基础日粮相比，总体上益生菌干预可以极显著提高断奶仔猪ADG(P<0.01),MD=47.42 g, 95%置信区间为[37.14,57.70];极显著提高断奶仔猪ADFI(P<0.01),MD=20.36 g, 95%置信区间为[9.37,31.34];极显著降低断奶仔猪FCR(P<0.01),MD=-0.15,95%置信区间为[-0.20,-0.10];极显著降低断奶仔猪腹泻率(P<0.01),MD=-0.92%,95%置信区间为[-1.26,-0.58];极显著增加断奶仔猪肠道乳酸杆菌数量(P<0.01),MD=0.65 lg(N/g),95%置信区间为[0.20,1.10];同时极显著减少断奶仔猪大肠杆菌数量(P<0.01),MD=-7.95 lg(N/g),95%置信区间为[-10.67,-5.24]。文献敏感性分析结果较为可靠，具有一定的发表偏倚，但偏倚程度不明显，不同菌种间的结果存在差异。说明益生菌可以减少或避免断奶仔猪应激综合征的发生。
2023年19期 No.679 100-106+141页 [查看摘要][在线阅读][下载 582K] [下载次数：285 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ]
- 姜博达;张文婷;张腾飞;刘廷江;廖卫东;郭云清;卢琴;罗青平;杨玉莹;
为了研究杨树花中潜在的抑菌活性成分杨梅素及二氢杨梅素对鸡白痢沙门氏菌的作用机制及其在杨树花中的含量，试验采用微量稀释法测定杨树花中杨梅素及二氢杨梅素对鸡白痢沙门氏菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC);采用菌落计数法测定两种成分对鸡白痢沙门氏菌的杀菌曲线；利用结晶紫染色法测定两种成分对鸡白痢沙门氏菌生物被膜形成的抑制率；建立用高效液相色谱测定杨树花中杨梅素和二氢杨梅素含量的方法。结果表明：杨梅素和二氢杨梅素对鸡白痢沙门氏菌的MIC分别为312.5μg/mL和625μg/mL,MBC分别为625μg/mL和1 250μg/mL。两种药物在1/2MIC浓度以上均对鸡白痢沙门氏菌有明显的杀灭效果；2MIC浓度时，杨梅素组细菌在10小时时被杀灭，二氢杨梅素组在8小时时被杀灭。同时1/2MIC杨梅素对生物被膜形成的抑制率达到64.6%(P<0.01)。建立的液相色谱方法线性关系、精密度、重复性良好，杨树花中杨梅素的含量为185.26μg/g、二氢杨梅素的含量为485.94μg/g。说明杨梅素及二氢杨梅素对鸡白痢沙门氏菌均有较好的体外杀菌效果且在杨树花中含量较高，其可能是杨树花发挥抑菌作用的重要活性成分。
2023年19期 No.679 107-111+116页 [查看摘要][在线阅读][下载 428K] [下载次数：531 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：0 ] - 姜博达;张文婷;张腾飞;刘廷江;廖卫东;郭云清;卢琴;罗青平;杨玉莹;
为了研究杨树花中潜在的抑菌活性成分杨梅素及二氢杨梅素对鸡白痢沙门氏菌的作用机制及其在杨树花中的含量，试验采用微量稀释法测定杨树花中杨梅素及二氢杨梅素对鸡白痢沙门氏菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC);采用菌落计数法测定两种成分对鸡白痢沙门氏菌的杀菌曲线；利用结晶紫染色法测定两种成分对鸡白痢沙门氏菌生物被膜形成的抑制率；建立用高效液相色谱测定杨树花中杨梅素和二氢杨梅素含量的方法。结果表明：杨梅素和二氢杨梅素对鸡白痢沙门氏菌的MIC分别为312.5μg/mL和625μg/mL,MBC分别为625μg/mL和1 250μg/mL。两种药物在1/2MIC浓度以上均对鸡白痢沙门氏菌有明显的杀灭效果；2MIC浓度时，杨梅素组细菌在10小时时被杀灭，二氢杨梅素组在8小时时被杀灭。同时1/2MIC杨梅素对生物被膜形成的抑制率达到64.6%(P<0.01)。建立的液相色谱方法线性关系、精密度、重复性良好，杨树花中杨梅素的含量为185.26μg/g、二氢杨梅素的含量为485.94μg/g。说明杨梅素及二氢杨梅素对鸡白痢沙门氏菌均有较好的体外杀菌效果且在杨树花中含量较高，其可能是杨树花发挥抑菌作用的重要活性成分。
2023年19期 No.679 107-111+116页 [查看摘要][在线阅读][下载 428K] [下载次数：531 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：0 ] - 费智国;徐敏丽;郭玲;逯璐;张琳;白莉雅;杨硕;李香远;吴家强;韩志强;丁志勇;林冬梅;蒋万春;
为了明确桦褐孔菌发酵制剂(Inonotus obliquus fermentation products, IOFP)对肉兔免疫性能的影响，试验将80只断奶肉兔随机分成两组，每组40只，对照组饲喂基础日粮，试验组饲喂添加0.8%IOFP的基础日粮。35日龄时免疫兔瘟灭活疫苗，在免疫后第0,7,14,21,28,35天分别采集两组肉兔的外周血进行兔瘟病毒特异性血凝抑制(hemagglutination inhibition, HI)抗体效价测定；取第35天的外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes, PBMC)测定其增殖率、CD4~+和CD8~+ T淋巴细胞亚群含量；取第0,14,35天的外周血血清测定相关细胞因子含量；在免疫后第35天，处死所有肉兔，测定肉兔胸腺和脾脏的器官指数。结果表明：在日粮中添加IOFP能显著提高肉兔血清中兔瘟病毒特异性HI抗体效价、PBMC增殖率和CD4~+、CD8~+ T淋巴细胞亚群含量(P<0.05),显著提高胸腺指数、第35天的外周血中γ干扰素和白细胞介素-4的含量(P<0.05)。说明IOFP可增强肉兔免疫系统功能，可作为理想的新型绿色免疫增强剂候选产品。
2023年19期 No.679 112-116页 [查看摘要][在线阅读][下载 359K] [下载次数：134 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 费智国;徐敏丽;郭玲;逯璐;张琳;白莉雅;杨硕;李香远;吴家强;韩志强;丁志勇;林冬梅;蒋万春;
为了明确桦褐孔菌发酵制剂(Inonotus obliquus fermentation products, IOFP)对肉兔免疫性能的影响，试验将80只断奶肉兔随机分成两组，每组40只，对照组饲喂基础日粮，试验组饲喂添加0.8%IOFP的基础日粮。35日龄时免疫兔瘟灭活疫苗，在免疫后第0,7,14,21,28,35天分别采集两组肉兔的外周血进行兔瘟病毒特异性血凝抑制(hemagglutination inhibition, HI)抗体效价测定；取第35天的外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes, PBMC)测定其增殖率、CD4~+和CD8~+ T淋巴细胞亚群含量；取第0,14,35天的外周血血清测定相关细胞因子含量；在免疫后第35天，处死所有肉兔，测定肉兔胸腺和脾脏的器官指数。结果表明：在日粮中添加IOFP能显著提高肉兔血清中兔瘟病毒特异性HI抗体效价、PBMC增殖率和CD4~+、CD8~+ T淋巴细胞亚群含量(P<0.05),显著提高胸腺指数、第35天的外周血中γ干扰素和白细胞介素-4的含量(P<0.05)。说明IOFP可增强肉兔免疫系统功能，可作为理想的新型绿色免疫增强剂候选产品。
2023年19期 No.679 112-116页 [查看摘要][在线阅读][下载 359K] [下载次数：134 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ]
- 马晓君;苏咏梅;朱文进;王茂晗;陈芝媛;赵涵;
为了探究TYR基因对中国家驴毛色的影响，试验利用PCR-SSCP方法对14个品种408个毛色表型记录清晰的中国家驴TYR基因第一外显子的多态性与毛色的关系进行了研究，并根据其毛色进行分类，计算不同毛色的基因型频率和基因频率。结果表明：中国家驴TYR基因在第一外显子存在g.259A→G突变位点，由此产生了三种基因型AA、AG和GG,该位点为异亮氨酸到缬氨酸的非同义突变。AA基因型频率在乌头驴、黑三粉驴、青三粉驴和灰三粉驴中的分布逐渐降低，GG基因型频率分布逐渐提高，2头白驴均为GG基因型；等位基因A和G的频率在灰三粉驴中相等，在其他毛色中，等位基因A的频率大于G。说明随着中国家驴被毛中黑色被毛分布的减少，AA基因型频率逐渐下降，GG基因型频率逐渐提高，该位点与中国家驴黑白被毛的形成有关。
2023年19期 No.679 117-120页 [查看摘要][在线阅读][下载 271K] [下载次数：188 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 马晓君;苏咏梅;朱文进;王茂晗;陈芝媛;赵涵;
为了探究TYR基因对中国家驴毛色的影响，试验利用PCR-SSCP方法对14个品种408个毛色表型记录清晰的中国家驴TYR基因第一外显子的多态性与毛色的关系进行了研究，并根据其毛色进行分类，计算不同毛色的基因型频率和基因频率。结果表明：中国家驴TYR基因在第一外显子存在g.259A→G突变位点，由此产生了三种基因型AA、AG和GG,该位点为异亮氨酸到缬氨酸的非同义突变。AA基因型频率在乌头驴、黑三粉驴、青三粉驴和灰三粉驴中的分布逐渐降低，GG基因型频率分布逐渐提高，2头白驴均为GG基因型；等位基因A和G的频率在灰三粉驴中相等，在其他毛色中，等位基因A的频率大于G。说明随着中国家驴被毛中黑色被毛分布的减少，AA基因型频率逐渐下降，GG基因型频率逐渐提高，该位点与中国家驴黑白被毛的形成有关。
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为探究促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone, GnIH)基因的序列特征及其在牦牛卵巢颗粒细胞中的表达与定位，试验从牦牛卵巢组织cDNA中克隆了GnIH基因，利用在线软件进行生物信息学分析，并采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测GnIH基因在牦牛各器官中的表达情况，通过免疫组织化学和免疫荧光法检测GnIH在组织中的表达及定位。结果表明：GnIH基因编码序列(CDS)区大小为591 bp,编码196个氨基酸；牦牛GnIH基因与黄牛和野牦牛同源性最高；GnIH前体为不稳定亲水酸性蛋白，且无跨膜结构，在第26,27个氨基酸间有信号肽区域，同时GnIH前体包含了3个磷酸化位点，二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。GnIH基因在卵巢中的相对表达量显著高于其他组织(P<0.05);随着卵泡的增长发育，GnIH基因在卵泡颗粒细胞中的表达量呈上升趋势，大卵泡(≥6 mm)中GnIH基因相对表达量最高，显著高于中(>3～<6 mm)、小卵泡(≤3 mm)(P<0.05),而中、小卵泡之间差异不显著(P>0.05)。GnIH在卵巢颗粒细胞的细胞核及细胞质中均有表达。说明牦牛GnIH基因参与了牦牛的卵泡发育调控。
2023年19期 No.679 121-127+142页 [查看摘要][在线阅读][下载 794K] [下载次数：190 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 胡宇磊;杨满珍;于海玲;朱艳锦;潘帮婷;付伟;熊燕;李键;熊显荣;
为探究促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone, GnIH)基因的序列特征及其在牦牛卵巢颗粒细胞中的表达与定位，试验从牦牛卵巢组织cDNA中克隆了GnIH基因，利用在线软件进行生物信息学分析，并采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测GnIH基因在牦牛各器官中的表达情况，通过免疫组织化学和免疫荧光法检测GnIH在组织中的表达及定位。结果表明：GnIH基因编码序列(CDS)区大小为591 bp,编码196个氨基酸；牦牛GnIH基因与黄牛和野牦牛同源性最高；GnIH前体为不稳定亲水酸性蛋白，且无跨膜结构，在第26,27个氨基酸间有信号肽区域，同时GnIH前体包含了3个磷酸化位点，二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。GnIH基因在卵巢中的相对表达量显著高于其他组织(P<0.05);随着卵泡的增长发育，GnIH基因在卵泡颗粒细胞中的表达量呈上升趋势，大卵泡(≥6 mm)中GnIH基因相对表达量最高，显著高于中(>3～<6 mm)、小卵泡(≤3 mm)(P<0.05),而中、小卵泡之间差异不显著(P>0.05)。GnIH在卵巢颗粒细胞的细胞核及细胞质中均有表达。说明牦牛GnIH基因参与了牦牛的卵泡发育调控。
2023年19期 No.679 121-127+142页 [查看摘要][在线阅读][下载 794K] [下载次数：190 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 林子俊;裴世敏;
生物样本库(biobank)是指具有系统性收集、储存和分发样本的存储系统，其建立有助于对疾病进行更为准确的诊疗。建立肿瘤样本库可以为肿瘤早期诊断试剂盒的研发、新药靶点的筛选与验证及肿瘤个体化治疗指导等提供服务平台。犬猫肿瘤样本库可提供高质量的生物样本，解决样本获取的难题，在研究和诊断疾病方面起着至关重要的作用。文章阐述了国内外犬猫肿瘤样本库的现状，指出了我国建设犬猫肿瘤样本库面临的问题，并总结了建立样本库的基本流程，以期为我国犬猫肿瘤样本库的建设提供参考。
2023年19期 No.679 128-131页 [查看摘要][在线阅读][下载 158K] [下载次数：160 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 林子俊;裴世敏;
生物样本库(biobank)是指具有系统性收集、储存和分发样本的存储系统，其建立有助于对疾病进行更为准确的诊疗。建立肿瘤样本库可以为肿瘤早期诊断试剂盒的研发、新药靶点的筛选与验证及肿瘤个体化治疗指导等提供服务平台。犬猫肿瘤样本库可提供高质量的生物样本，解决样本获取的难题，在研究和诊断疾病方面起着至关重要的作用。文章阐述了国内外犬猫肿瘤样本库的现状，指出了我国建设犬猫肿瘤样本库面临的问题，并总结了建立样本库的基本流程，以期为我国犬猫肿瘤样本库的建设提供参考。
2023年19期 No.679 128-131页 [查看摘要][在线阅读][下载 158K] [下载次数：160 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ]